شريط اختبار سريع عالي الحساسية لـ 96 عينة لمدة 10 دقائق لـ β-Lactams و Tetracyclines (BT) للكشف عن بقايا المضادات الحيوية في الحليب

شريط اختبار BT المزدوج هو مقايسة تدفق جانبي سريعة ونوعية مصممة للكشف عن بقايا المضادات الحيوية من نوع بيتا لاكتام والتتراسيكلين في حليب البقر الخام الممزوج. يستخدم هذا الاختبار مستقبل التتراسيكلين وبروتين ربط بيتا لاكتام جديد يلغي الحاجة إلى كتلة تسخين. تم تصميم هذا الاختبار للاستخدام في نقطة الرعاية أو في مختبرات مرجعية.

يشير خط التحكم (C-line) إلى وجود المضاد الحيوي المقابل في الحليب. كلما قلّت شدة الإشارة عند خط الاختبار، زاد تركيز التتراسيكلين أو مضادات بيتا لاكتام الحيوية الموجودة في الحليب. تم تصميم المقايسة أيضًا للكشف عن مضادات التتراسيكلين وبيتا لاكتام في وقت واحد.

شريط اختبار BT المزدوج لديه القدرة على إجراء 96 تحديدًا. مدة الصلاحية هي 12 شهرًا عند تخزين المجموعة بشكل صحيح. تحتوي قوارير التحكم الإيجابي والسلبي على عينات حليب خام مجففة بالتجميد، ويجب إعادة تكوينها باستخدام 1 مل من الماء المقطر قبل الاستخدام. تم تدعيم قارورة التحكم الإيجابي بـ 4 جزء في المليار من البنسلين جي و 100 جزء في المليار من الأوكسي تتراسيكلين. ضوابط الحليب الخام المعاد تكوينها مستقرة لمدة 48 ساعة عند 4 درجات مئوية. تتوفر قوارير تحكم إيجابية وسلبية إضافية بشكل منفصل.

يستخدم المقايسة صيغة تنافسية تعتمد على الذهب الغروي. يتم إضافة عينة الحليب (200 ميكرولتر) إلى وعاء تفاعل بلاستيكي شفاف، ويتم استخدامها لإعادة تعليق الكواشف المجففة بالتجميد إلى لون وردي موحد في قاع آبار الميكروتيتر. يتم حضن الحليب لفترة وجيزة (3 دقائق) للسماح لبروتينات ربط المضادات الحيوية على جزيئات الذهب بالارتباط بأي مضاد حيوي موجود في الحليب.

ثم يتم إدخال شريط الاختبار في بئر العينة مع توجيه الأسهم لأسفل لبدء تدفق شعري لأعلى الشريط. أي جزيئات ذهب غير مرتبطة بالمضادات الحيوية الموجودة في الحليب سترتبط بخط الاختبار المقابل لها، مكونة إشارة (خط أحمر) في هذا الموضع. كل شريط اختبار مطبوع بخطين اختباريين وخط تحكم واحد (خط C). يسمح أحد خطوط الاختبار بالكشف عن التتراسيكلين، والآخر للكشف عن مضادات بيتا لاكتام الحيوية.

إذا ارتبط بروتين الربط الموجود على جزيء الذهب بأي من التتراسيكلين أو مضاد بيتا لاكتام حيوي موجود في عينة الحليب، فإن جزيء الذهب سيتدفق عبر خط الاختبار المقابل لهذا المضاد الحيوي ويصل إلى خط التحكم (C-line). للتفسير البصري لنتائج الاختبار، فإن أي شدة إشارة لخط الاختبار تكون أقوى من الإشارة عند خط التحكم تشير إلى نتيجة سلبية. الإشارة عند أي خط اختبار تكون مساوية أو أقل شدة مقارنة بخط التحكم تشير إلى نتيجة إيجابية.