مجموعة اختبار الكولستين ELISA قابلية إعادة إنتاج عالية حساسية عالية

تأكد من تخزين العينات بشكل صحيح. بشكل عام، يجب أن تبقى العينات في الثلاجة عند 2-4 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن 1-2 أيام.

تجميد العينات إلى درجة حرارة لا تقل عن -20 درجة مئوية إذا كانت بحاجة إلى تخزينها لفترة أطول. يمكن ذوبان العينات المجمدة في درجة حرارة الغرفة (20‬‬C / 68 ¢ 77‬‬أو في الثلاجة قبل الاستخدام.

1تحضير 1X Colistin Extraction Buffer I:

خلط حجم واحد من 10X Colistin Extraction Buffer I مع 9 كميات من الماء المقطر.

2تحضير 1X Colistin Extraction Buffer II لاستخراج اللحومخلط 1 كمية من 6X Colistin Extraction Buffer II مع 5 كميات من الماء المقطر.

3تحضير 3X Colistin Extraction Buffer II لاستخراج العلف والروبيانخلط 3 كميات من 6X كولستين استخرج بوفر II مع 3 كميات من الماء المقطر.

اللحوم(لحوم البقر والخنزير والدجاج)

1إزالة الدهون من اللحوم، وتجانس كمية معقولة من العينة مع خلاط مناسب.

2يزن 1 غرام من عينة اللحوم المتجانسة، ويضاف 3.5 مل 1X Colistin Extraction Buffer I و 500 لتر 1X Colistin Extraction Buffer II، ويضاف 3 مل من دوامة n-hexane أو يتم هزها لمدة 3 دقائق.

3طرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 4000 جرام في درجة حرارة الغرفة (20 25‬‬C / 68 ¢ 77‬‬إف) 4. استنشاق وتخلص من طبقة n-hexane ، ثم نقل 500 ليرة واحدة من supernatant إلى أنبوب جديد يحتوي على 200 ليرة واحدة من 10X Colistin Extraction Buffer ،200 لتر من 100٪ الإيثانول و 100 لتر من عازل التوازن الكولستين.

5إرتجف أو هز لمدة 30 ثانية بسرعة قصوى

6استخدم 75 ليتر لكل بئر في اختبار ELISA.

ملاحظة: عامل التخفيف:10 مسحوق اللحوم

1.تجانس كمية معقولة من العينة بمزج مناسب

2وزن 0.5 غرام من العينة المتجانسة، وأضاف 3.5 مل 1X Colistin Extraction Buffer I و 500 لتر 1X Colistin Extraction Buffer II، وأضاف 3 مل من دوامة n-hexane أو هز لمدة 3 دقائق.‬‬تحضير العينة

ن3طرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 4000 جرام في درجة حرارة الغرفة (20 25‬‬C / 68 ¢ 77‬‬(ف).

4تستنشق ويتم التخلص من طبقة الهكسان، ثم نقل 500 ليرة واحدة من المادة فوق المستوى إلى أنبوب جديد يحتوي على 200 ليرة واحدة من 10X Colistin Extraction Buffer.200 لتر من 100٪ الإيثانول و 100 لتر من عازل التوازن الكولستين.

5إرتجف أو هز لمدة 30 ثانية بسرعة قصوى

6استخدم 75 ليتر لكل بئر في اختبار ELISA.

ملاحظة: عامل التخفيف: 16

1.تجانس كمية معقولة من العينة بمزج مناسب

2يزن 0.5 غرام من العينة المتجانسة، ويضاف 2 مل من 0.1M HCl و 2 مل من n-hexane، ويتم خلطه عن طريق الدوران بسرعة عالية لمدة 3 دقائق.

3طرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 4000 جرام في درجة حرارة الغرفة (20 25‬‬C / 68 ¢ 77‬‬ف) 4. استنشاق والتخلص من طبقة n-هيكسان، ثم نقل 200uL من السوبرناتنت إلى أنبوب الطرد المركزي نظيفة، إضافة 150uL من 1×كوليستين استخراج العازل الأول، وتحريك بسرعة عالية لمدة 30 ثانية.

5استخدم 75 ليتر لكل بئر في اختبار ELISA.

ملاحظة: عامل التخفيف:8.75 الأسماك/الروبيان

1.تجانس كمية معقولة من العينة بمزج مناسب

2يزن 1.0 غرام من عينة اللحوم المتجانسة، ويضاف 3.5 مل 1X Colistin Extraction Buffer I و 500 ليل 3X Colistin Extraction Buffer II، ويضاف 3 مل من دوامة n-hexane أو يُمزج لمدة 3 دقائق.

3طرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 4000 جرام في درجة حرارة الغرفة (20 25‬‬C / 68 ¢ 77‬‬ف) 4. استنشاق وتخلص من طبقة n- هيكسان، ثم نقل 200 ليرة واحدة من السوبرناتنت إلى أنبوب جديد يحتوي على 300 ليرة واحدة من المياه المقطرة، 200 ليرة واحدة من 10X كولستين استخراج العازل،200 لتر من 100٪ الإيثانول و 100 لتر من عازل التوازن الكولستين.

5إرتجف أو هز لمدة 30 ثانية بسرعة قصوى

6استخدم 75 ليتر لكل بئر في اختبار ELISA.

ملاحظة: عامل التخفيف:25