مجموعة اختبار ELISA لـ 96T High Recovery Dibutylphthalate DBP لـ زيت النبتة زيت الصويا زيت الفول السوداني زيت الذرة والزيت المختلط

المفاعلات والحاويات المطلوبة ولكن غير المقدمة هي كما يلي:
سلفوكسيد الديميثيل، نقي للتحليل
(2) المياه المهجورة
(3) أنبوب الطرد المركزي الزجاجي 5 مل، قنينة زجاجية 2 مل

زيت غذائي للحيوانات والنباتات
يزن 1.5 ± 0.01 غرام من عينة الزيت في أنبوب طرد مركزي زجاجي 5 مل، ويضاف 1.5 مل من سلفوكسيد الديميثيل ويتم هزها لمدة 3 دقائق.
2) الطرد المركزي عند 4000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.
3) تخلص من الطبقة السائلة العليا، وتأخذ 1 مل من الطبقة السفلية وتضيفها إلى أنبوب التنقية، ثم إضافة 0.2 مل من عامل التنقية DBP A وتحريك لمدة دقيقة واحدة.
4) الطرد المركزي عند 4000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.
5) خذ 0.1mL من السوبرنيتانت وأضفها إلى 0.9mL من مخفف العينة ، ثم الدوران لمدة 15 ثانية.
عامل تخفيف العينة: 10

2.خطوات التشغيل
قبل التجربة، يرجى إخراج مجموعة الاختبار من الثلاجة عند 2-8 درجة مئوية وتوازنها عند درجة حرارة داخلية 20-28 درجة مئوية لمدة تزيد عن ساعة واحدة!
تحضير المفاعل
محلول الغسيل (1 ×) : خذ 1 حجم من محلول الغسيل المركز 20 × ، أضف 19 حجم من الماء غير المؤين أو المياه المقطرة ، خلط جيدا ، ووضع جانبا. يمكن إعداده حسب الحاجة
1) أخرج كمية مناسبة من الشرائط المتوازنة و ضع الباقي مرة أخرى في كيس الفيلم الألومنيوم.
2) إضافة 150μL من عامل تنشيط DBP إلى الأفقيات الدقيقة؛ الضغط على إطار اللوحة بلطف.
3) غطي اللوحة، دعها تقف عند درجة حرارة 20-28 درجة مئوية لمدة 5 دقائق، ثم صبها واطرح السائل في الثقوب جافة قدر الإمكان على قماش اللوحة.
4) إضافة 50μL من المعيار / العينة إلى الأفقات المقابلة بالترتيب ؛ إضافة 50μL من المزج الإنزيمي و 50μL من الأجسام المضادة إلى جميع الأفقات المجهولة ؛ النقر على إطار اللوحة برفق.
5) تغطي الصفيحة وتحويلها عند درجة حرارة 20-28 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.
6) املأ الميكروبورات بمحلول الغسيل ، وقم بتثبيته لمدة 15 ثانية ، ثم صبها. كرر هذه العملية 4 مرات لمجموع 5 مرات.و أضع السائل في الثقب جافاً قدر المستطاع على قماش المضرب;
7) إضافة 100 ميكرو لتر من الركيزة إلى الحفر الدقيقة، وضغط برفق على رف الصفيحة، وغطاء شريط الصفيحة، وتحضير في درجة حرارة 20-28 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
8) إزالة رقعة اللوحة، لا تصب السائل، إضافة مباشرة 100μL من محلول وقف إلى microwells، النقر بلطف على إطار اللوحة، واتخاذ القراءة في طول موجة 450/630nm.